Fase1: La Estimulación Ovarica
Consiste en inducir una ovulación múltiple mediante medicaciones hormonales.
Durante el ciclo menstrual espontáneo inician su desarrollo muchos folículos dentro de cada ovario, pero cuando uno de ellos alcanza un tamaño un poco mayor se produce una inhibición del crecimiento de los demás; con el tratamiento se intenta que se desarrollen hasta la madurez completa varios folículos.
Que es un folículo?
Es el lugar del ovario donde se desarrolla el ovocito, la célula reproductora femenina. A lo largo de la primera fase del ciclo menstrual de la mujer se produce el desarrollo del folículo, empieza siendo de tamaño microscópico y crece rellenándose de líquido con nutrientes para el ovocito hasta unos 22 mm. En ese momento se abre un orificio en su pared y sale el ovocito; esto es la ovulación.
En que consisten los controles de estimulación?
En una analítica de sangre para determinar los niveles de estradiol, que es la hormona que producen los folículos en crecimiento y una ecografía vaginal para observar cuantos folículos se están desarrollando en los ovarios y que tamaño tienen.
En función estas pruebas se adecúa la dosis de la medicación y se indica el siguiente control 1 ó 2 días después. Cuando los folículos han alcanzado un tamaño superior a 20 mm. de diámetro y los niveles de estradiol son adecuados se indica la inyección de HCG. Esta hormona induce los últimos cambios madurativos y la ovulación.
Fase 2: Los ovocitos recuperados llegan al laboratorio
Que es un Ovocito?
Un ovocito es la célula reproductora femenina. Los ovocitos se forman en el ovario, en el interior de los folículos. El funcionamiento del ovario en la especie humana es cíclico y cada 28 días aproximadamente se produce la maduración de un ovocito.
Como llegan al laboratorio?
Los ovocitos llegan al laboratorio en tubos estériles e inmersos en el líquido folicular, rodeados de células del cúmulo. Se localizan mediante el microscopio, se limpian y se guardan en el incubador con medio de cultivo y a 37ºC.
A los pocos minutos de haber realizado la recuperación de óvulos ya se han analizado todos los líquidos foliculares y la pareja es informada del número de ovocitos obtenidos.
La calidad de los ovocitos:
La calidad de los ovocitos es una característica intrínseca de cada mujer y evidentemente no todos los ovocitos obtenidos en la punción ovárica tienen la misma calidad.
Tras la punción ovárica se obtiene un grupo heterogéneo de ovocitos, de los que aproximadamente el 80% son maduros, pero también nos encontramos con ovocitos inmaduros y ovocitos con aspecto degenerado y atrésico. Este último grupo de ovocitos no es apto para la Fecundación in Vitro.
Fase 3: Los espermatozoides llegan al laboratorio
Una vez finalizada la punción ovárica se solicita la muestra de semen al varón. Se obtiene la muestra por masturbación, en un recipiente estéril, previo lavado de manos y genitales. Para ello se le proporciona un recipiente estéril, unas gasas y unos guantes. Una vez obtenida la muestra se entrega directamente en mano a los biólogos que la etiquetarán y la empezarán a procesar antes de transcurrida una hora de su obtención.
Fase 4: La fecundación (la unión del ovocito con el espermatozoide)
Existen dos metodos para llevar a cabo la fecundación:
a) FIV convencional: Consiste en facilitar el encuentro entre el ovocito y los espermatozoides, para conseguir la fusión de los códigos genéticos de ambos miembros de la pareja. Para ello, se ponen en contacto los ovocitos y una concentración determinada de espermatozoides procesados (cien mil espermatozoides de buena movilidad), en medio de cultivo y se incuban a 37ºC hasta el momento de detectar la fecundación.
b) ICSI (Inyección Intracitoplasmática del espermatozoide)): La ICSI es una técnica muy sofisticada y que requiere una gran precisión y experiencia por parte del biólogo. Consiste en la introducción de un espermatozoide 'vivo' dentro del citoplasma del ovocito.Las posibilidades de éxito con ICSI son similares a las de la FIV convencional. Sin embargo, es importante considerar que las parejas sometidas a ICSI tienen un problema primario mucho más grave: la dificultad de fecundación con los espermas del varón. Por ello es importante destacar que con esta técnica, incluso con muestras de esperma de la más baja calidad, únicamente en el 2% de los casos se produce un fallo de fecundación de todos los ovocitos inyectados, pero suelen ser casos con menos de tres ovocitos maduros disponibles.
Un dia después de la fecundación:
Tras 17-20h. de la inseminación se observan los ovocitos bajo el microscopio invertido a 400x aumentos para detectar si se ha producido o no fecundación. Un ovocito fecundado es aquel que presenta dos pronúcleos, correspondientes a los códigos genéticos femenino y masculino.
Podemos encontrarnos con ovocitos fecundados correctamente, ovocitos no fecundados y ovocitos fecundados de forma anómala.
Dos días después de la Fecundación: A las 48 horas de la FIV se observan los primeros embriones. Al igual que las personas, no existen dos embriones iguales: cada embrión tiene sus propias características y en este momento ya puede estar dividido en 2, 3, 4 o 5 células. Tampoco dentro de un mismo ciclo todos los embriones presentan la misma calidad.Podemos considerar que un buen embrión en el segundo día es el que presenta 4 células de igual tamaño, con porcentajes de fragmentación no superiores al 10-15%.
Los embriones tienen que haber duplicado el número de células que tenían en el segundo día.Un buen embrión en el tercer día es el que presenta entre 7 y 9 células, con porcentajes de fragmentación variables no superiores al 5-15 %.

Fase 5: La transferencia de los embriones:
La transferencia embrionaria (TE) es la introducción de los embriones en el útero materno. Justo antes de la Transferencia Embrionaria se colocan los embriones seleccionados en medio de cultivo específico. Los embriones se cargan en el extremo del catéter de transferencia y se depositan suavemente dentro de la cavidad uterina.
Los embriones no transferidos al útero, siempre que presenten buen aspecto morfológico, se congelan para posteriores ciclos. Si presentan mala morfología, se mantienen en cultivo secuencial y si llegan a desarrollarse hasta blastocisto, pueden ser entonces congelados.

Fase 6: Congelación y descongelación de embriones:
Después de la transferencia del número de embriones adecuado para cada caso, el resto de embriones viables son sometidos a un proceso de congelación para poder conservarlos durante un tiempo. Este procedimiento permite la disponibilidad de estos embriones en el momento en que sean requeridos por la pareja. Si no ha habido embarazo, o tras haber finalizado el mismo, se procede a la descongelación y transferencia de los embriones que sobreviven a la congelación.
Para preparar de forma óptima el endometrio y mejorar así las probabilidades de embarazo se indica una medicación en parches transdérmicos (valerianato de estradiol) y comprimidos vaginales (progesterona) durante aproximadamente 15 días.
Fase 7: La Implantación
Es el proceso en que el embrión se adhiere a la pared interna del útero (llamada endometrio) y penetra en el interior de la misma para seguir desarrollándose. La implantación se produce cuando el embrión está en estadio de blastocisto, unos 5 a 6 días tras su formación. Cuando se hace la transferencia embrionaria a los 2 ó 3 días tras la recuperación de ovocitos, el embrión continúa su división celular dentro del útero y no se implanta hasta 2 ó 4 días después.
Para que se lleve a cabo la implantación es necesario que el endometrio esté perfectamente preparado, que el embrión tenga potencial evolutivo y que se establezca una compenetración entre los cambios que se van produciendo en ambos.
Es una técnica de Reproducción Asistida en la que los ovocitos se fecundan con los espermatozoides en el laboratorio, y los embriones así obtenidos se depositan en el útero de la paciente.

